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基本信息

项目名称:
猪瘟胶体金快速诊断试纸条的研制
小类:
生命科学
简介:
为建立一种快速、简便的检测猪瘟病毒(CSFV)的胶体金免疫层析法(GICA)。采用柠檬酸钠还原法制备胶体颗粒,用CSF抗体标记纯化,并包被在玻璃纤维膜上,另外将纯化的CSF抗体和羊抗鼠抗体包被在硝酸纤维膜上,组装成CSF快速检测条,对猪瘟病毒进行及时检测。 结果显示,所研制的CSF试剂条在用于CSF诊断时,具有快速、灵敏、特异、简便等特点,其应用价值十分广阔。
详细介绍:

作品专业信息

撰写目的和基本思路

本实验结合指导老师的科研项目,建立一种快速、简便的检测猪瘟病毒(CSFV)的胶体金免疫层析法(GICA),结果显示,所研制的CSF试剂条在用于CSF诊断时,具有快速、灵敏、特异、简便等特点,其应用价值十分广阔。

科学性、先进性及独特之处

1. 采用柠檬酸钠还原法制备胶体颗粒,用CSF抗体标记纯化,并包被在玻璃纤维膜上,另外将纯化的CSF抗体和羊抗鼠抗体包被在硝酸纤维膜上,组装成CSF快速检测条,对猪瘟病毒进行及时检测。 2. 使用所研制CSF快速检测条,检测收集的70份待检样品,检出猪瘟阳性病例26例,而经病毒分离鉴定阳性病例有28例,阳性符合率达92.8%,将5份阳性猪瘟病毒稀释后用试纸条和ELISA方法进行敏感性实验。

应用价值和现实意义

1、首次研制CSF快速检测条。 2、将纯化的CSF抗体和羊抗鼠抗体包被在硝酸纤维膜上,组装成CSF快速检测条,对猪瘟病毒进行及时检测。

学术论文摘要

为建立一种快速、简便的检测猪瘟病毒(CSFV)的胶体金免疫层析法(GICA)。采用柠檬酸钠还原法制备胶体颗粒,用CSF抗体标记纯化,并包被在玻璃纤维膜上,另外将纯化的CSF抗体和羊抗鼠抗体包被在硝酸纤维膜上,组装成CSF快速检测条,对猪瘟病毒进行及时检测。使用所研制CSF快速检测条,检测收集的70份待检样品,检出猪瘟阳性病例26例,而经病毒分离鉴定阳性病例有28例,阳性符合率达92.8%,将5份阳性猪瘟病毒稀释后用试纸条和ELISA方法进行敏感性实验,结果表明诊断试纸条的敏感性较高,用试制条对ND、EDS-76、TGEV、蓝耳病病毒进行检测,无交叉反应。结果显示,所研制的CSF试剂条在用于CSF诊断时,具有快速、灵敏、特异、简便等特点,其应用价值十分广阔。

获奖情况

[1]. 赵强,杨明.猪瘟胶体金快速诊断试纸条的研制.甘肃工业职业技术学院学报.2009年第12期. [2]. 杨明.猪瘟胶体金快速诊断试纸条的研制.甘肃农业大学学报.2009年第10期

鉴定结果

参考文献

[1] 王东勇,张松乐.免疫胶体金技术快速诊断中的应用[J].中国卫生检验杂志,2003,13(3):391-392. [2] 孔繁德,黄印尧,赖清金,等.斑点免疫金渗滤法检测猪瘟抗体的研究[J].中国动物检疫,2003,20(11):27-29. [3] 黄印尧,张长弓,方 莹,等.用于检测猪瘟抗体的免疫金标试纸条的研制与应用研究[J].福建畜牧兽医,2002,1(24):3-4. [4] 沈关心,周汝麟.现代免疫学试验技术[M].武汉:湖北科技出版社,2002:132-135. [5] 侯惠仁,吴冯波,陈 键,等.AFP免疫层析测试条的研制[J].同位素,2000,13(3):142-146. [6] 吴冯波,侯惠仁,贺佑丰,等.免疫层析分析进展[J].中华医学检验杂志,1998,21(2):122. [7] 张长弓,金颜辉,黄印尧,等.口蹄疫抗体免疫金标快速检测试纸法的建立[J].福建畜牧兽医,2004,26(1):4-5. [8] 姜先荣,杨杰.胶体金标记蛋白及应用[J].安徽教育学院学报,1998,2:60-61. [9] 马丽丽,王玉金,杨书豪,等.快速乙肝表面抗原胶体金免疫层析测定法的建立及应用[J].标记免疫分析与临床,1997,4(4):225-227.

同类课题研究水平概述

猪瘟是由猪瘟病毒(CSFV)引起的猪的一种最严重的传染病,不同品种和年龄的猪均发生。猪瘟每年给养猪业造成的经济损失相当严重。我国在上世纪80年以后,随着规模化、集约化养猪业的迅速发展,大量生猪及其产品流通,隐性感染猪在全国范围内频繁流动,使得CSF在我国呈现出区域性、散发性流行,疫情始终不断。而且在许多地方出现了所谓“非典型CSF”和猪瘟病毒(CSFV)的持续感染、垂直感染,给养猪业造成极大的危害。 目前常规的方法ELISA、PCR、荧光法等,往往需要必要的仪器设备和试剂,费时费力,基层兽医部门往往不具备工作条件和技术力量。胶体金快速免疫层析技术是上世纪90年代国外兴起的一种快速诊断技术。国内近年来在医学上研究成功了许多诊断试剂盒或纸条,而动物医学方面研究出的产品较少,应用于临床的更少。为此,我们开展了利用胶体金快速免疫层析技术研制一种快速、准确诊断CSF试纸条。 本研究采用胶体金快速免疫层析技术所研制的猪瘟(抗原)快速诊断试剂条具有灵敏性高、特异性强、重复性好、操作简便快速,达到了研制的要求,是一项目市场前景好的产品,值得推广。
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