主办单位: 共青团中央   中国科协   教育部   中国社会科学院   全国学联  

承办单位: 贵州大学     

基本信息

项目名称:
黄芪注射液对大鼠脊髓损伤后HIF-1α基因表达的影响研究
小类:
生命科学
简介:
目前有关大鼠脊髓损伤后HIF-1α基因表达的研究国内外较少。本文在指导教师课题组的前期研究工作基础上,应用免疫组化和RT-PCR方法检测了HIF-1α基因在脊髓损伤后不同时间点的表达情况,得出了HIF-1α基因在损伤脊髓组织中有明显表达,而且在第三天时表达水平达到高峰,得出黄芪注射液通过促进HIF-1α基因的表达,对损伤的脊髓组织起到保护作用。
详细介绍:
关于大鼠脊髓损伤后HIF-1α基因表达的研究,国内外较少;对“黄芪注射液对大鼠脊髓损伤后HIF-1α基因表达的影响”的研究,国内外目前未见相关报道。 脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)临床多见且致瘫率高,本作品旨在探讨大鼠脊髓损伤后不同时相低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达规律、黄芪对HIF-1α表达的影响,从而进一步研究黄芪注射液对大鼠脊髓损伤后的作用及机制,以为其临床应用提供理论依据。 选取成年雄性Wistar大鼠108只,随机分成假手术组、模型组和黄芪注射液干预组,并分为术后1d、3d、5d、7d、14d、21d六个时相点。大鼠脊髓损伤模型制备应用自制改良Allen`s造模设备。各组分别进行BBB功能评分,采用免疫组化和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测HIF-1α基因的表达变化。BBB功能评分结果:假手术组运动功能良好,模型组与黄芪注射液干预组造模后运动功能基本丧失,随着时间推移开始恢复,黄芪注射液干预组恢复速度大于模型组。免疫组化结果显示:假手术组脊髓组织中极少能检测到HIF-1α免疫阳性细胞,模型组稍有增多,黄芪注射液干预组明显增多,各实验组结果之间均有统计学意义( P<0. 05)。伤后1d, HIF-1α阳性产物开始增多,伤后3d达峰值,细胞定位于胞浆和/或胞核。HIF-1α免疫阳性细胞数在伤后3~7d期间一直维持在一个较高水平。RT-PCR结果显示:模型组脊髓损伤后各个时间点HIF-1α mRNA平均光密度值均较假手术组明显增加(P<0.05),且在3d出现高峰,之后逐渐下降;与模型组相比,黄芪注射液组各个时间点脊髓HIF-1α mRNA条带光密度值均明显增加(P<0.05)。 结果提示, 脊髓损伤后,黄芪注射液通过促进HIF-1α基因的表达,可提高组织和细胞对缺血缺氧环境的适应,进而发挥对神经系统的保护与修复作用。

作品图片

  • 黄芪注射液对大鼠脊髓损伤后HIF-1α基因表达的影响研究
  • 黄芪注射液对大鼠脊髓损伤后HIF-1α基因表达的影响研究
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  • 黄芪注射液对大鼠脊髓损伤后HIF-1α基因表达的影响研究
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作品专业信息

撰写目的和基本思路

脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)临床多见且致瘫率高,其有两种创伤机制作用于脊髓:原发性损伤及在其基础上发展起来的继发性损伤,如何防止继发性损伤的发生、发展是目前研究的热点。本课题旨在讨论大鼠脊髓损伤后不同时相低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达规律、黄芪对HIF-1α表达的影响,从而进一步研究黄芪注射液对大鼠脊髓损伤后的作用及机制,以为其临床应用提供理论依据。

科学性、先进性及独特之处

脊髓损伤早期,有效控制缺血、缺氧诱导的继发性病理损伤是减轻脊髓损伤的关键。HIF-1α 可提高组织和细胞对缺血缺氧环境的适应。黄芪在缺血、低氧时, 有清除氧自由基和改善微循环障碍等功效。 故选题科学、先进。用免疫组化和RT-PCR反应分别在蛋白和mRNA水平上研究不同时间点HIF-1α表达,相关文献较少。黄芪注射液对大鼠脊髓损伤后HIF-1α基因表达的影响研究, 当前国内外未见文献报道。

应用价值和现实意义

脊髓损伤是临床上常见的致瘫率较高的疾病,常导致损伤平面以下运动及感觉功能不完全或完全丧失。当前国际,脊髓损伤人数不断增多。多年来,人们对脊髓损伤修复一直持悲观态度。因此,研究脊髓损伤机制、防治继发性损伤, 促进神经损伤修复和神经再生,具有重要意义,已成为当前国内外研究热点之一。另外, 通过本研究, 可能对脊髓损伤后的治疗提供新靶点, 并为黄芪在临床脊髓损伤患者中的应用, 提供重要理论依据。

学术论文摘要

目的 观察黄芪注射液对大鼠脊髓损伤后HIF-1α基因表达影响。 方法 选取雄性Wistar大鼠(260-280g)108只,随机分成假手术组(A组,n=36)、模型组(B组,n=36),黄芪注射液干预组(C组,n=36),A组大鼠只开椎板,B、C组大鼠采用改良Allen`s造模法制备大鼠脊髓损伤模型,并分为术后1d、3d、5d、7d、14d、21d亚组。各组分别进行BBB功能评分,采用免疫组化和RT-PCR检测HIF-1α基因的表达。 结果 免疫组化结果:假手术组脊髓组织中极少能检测到HIF-1α免疫阳性细胞,模型组稍有增多,黄芪注射液干预组明显增多。伤后1d, HIF-1α阳性产物增多,伤后3d达峰值,细胞定位于胞浆和/或胞核。RT-PCR结果:模型组脊髓损伤后各个时间点HIF-1α mRNA平均光密度值均较假手术组明显增加(P<0.05),且在3d出现高峰,之后逐渐下降;与模型组相比,黄芪注射液组各个时间点脊髓HIF-1α mRNA平均光密度值均明显增加(P<0.05)。 结论 黄芪注射液通过促进HIF-1α基因的表达,对损伤的脊髓组织起到保护作用。

获奖情况

承德医学院大学生课外学术科技作品竞赛一等奖

鉴定结果

(无)

参考文献

技术: 1、Allen's造模方法 2、BBB功能评分方法 3、免疫组化技术 4、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR技术)

同类课题研究水平概述

目前,脊髓损伤的治疗方法趋于多样化,但效果平平,都无法到达预期的治疗效果。目前国内外研究脊髓损伤的主要方向:⑴减少脊髓损伤后早期创伤、炎症等有害作用。⑵对脊髓再生给予营养支持,阻止抑制因子的影响。⑶支持轴突再生,促进损伤轴突和靶器官的联系。⑷开发利用不完全脊髓损伤的残存功能和仍完整的神经纤维。治疗最重要的原则仍是血压支持,外科治疗的效果仍不明确,早期手术的指征和时机需进一步研究,大剂量类固醇的应用已成为标准治疗的方法之一,功能性电刺激的研究正在积极进行,近期专家研究发现HIF-1α基因修饰神经干细胞移植可促进脊髓损伤轴突再生,减少胶质细胞增生和胶质疤痕形成,为神经再生提供有利的微环境。西医药物治疗脊髓损伤包括激素、维生素等。中药治疗脊髓损伤的实验研究已经越来越广泛,而且成果较令人满意,其中包括黄芪、丹参、补阳还五汤等,也为临床治疗脊髓损伤提供了理论依据。当前治疗趋于联合应用,损伤机制尚待进一步研究。关于大鼠脊髓损伤后HIF-1α基因表达的研究,国内外较少;对“黄芪注射液对大鼠脊髓损伤后HIF-1α基因表达的影响”的研究,国内外目前未见相关报道。
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