主办单位: 共青团中央   中国科协   教育部   中国社会科学院   全国学联  

承办单位: 四川大学     

基本信息

项目名称:
丹参水溶性部位抑制血管内皮细胞凋亡的作用及机制研究
小类:
生命科学
简介:
探明丹参水溶性部位对脂多糖(LPS)处理的血管内皮细胞(VEC)凋亡的保护作用及机制。内毒素处理培养的人脐静脉内皮细胞造成细胞凋亡。培养液中添加系列浓度的丹参水溶性成分培养细胞,倒置相差显微镜观测细胞形态变化。吖啶橙染色,共聚焦显微镜观测凋亡细胞核片段化状况;PI染核,流式细胞仪检测细胞周期分布。
详细介绍:
目的 探明丹参水溶性部位对脂多糖(LPS)处理的血管内皮细胞(VEC)凋亡的保护作用及机制。方法 内毒素处理培养的人脐静脉内皮细胞造成细胞凋亡。培养液中添加系列浓度的丹参水溶性成分培养细胞,倒置相差显微镜观测细胞形态变化。吖啶橙染色,共聚焦显微镜观测凋亡细胞核片段化状况;PI染核,流式细胞仪检测细胞周期分布。生化试剂盒检测细胞内丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性。结果 脂多糖处理使血管内皮细胞形成大量凋亡小体,细胞核片段化严重。明显降低了细胞存活率,改变了细胞周期的正常分布,阻止细胞由G1期进入S期。同时显著上调了细胞中的MDA含量,而下调了其中的SOD、GSH-PX活性明显。丹参水溶性部位在一定浓度范围内,剂量依赖性地逆转脂多糖引起的上述变化。结论 丹参水溶性部位可能通过调节细胞氧化应激状态抑制脂多糖导致的血管内皮细胞凋亡。 丹参具有抗动脉粥样硬化、改善微循环、抑制和解除血小板聚集、增加冠脉流量等药理学作用,对多种心脑血管疾病疗效显著。血管内皮损伤是多种血脑管类疾病的始动环节和中心环节,因而保护、修复内皮细胞的功能也成为防治该类疾病的重要途径。 现有的丹参保护血管内皮细胞的研究,均针对丹参复方、丹参全成分或丹参的脂溶性成分;未见关于丹参水溶性部位对血管内皮药理作用的报道。而鉴于中药传统的用药方式,研究丹参水溶性部位的药理活性更有意义。我们利用内毒素(脂多糖,LPS)诱导人脐静脉血管内皮细胞(Human Umbilical Vascular Endothelial Cells, HUVEC)凋亡,研究丹参水溶性部位对血管内皮细胞的保护作用。

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  • 丹参水溶性部位抑制血管内皮细胞凋亡的作用及机制研究
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作品专业信息

撰写目的和基本思路

探明丹参水溶性部位对脂多糖(LPS)处理的血管内皮细胞(VEC)凋亡的保护作用及机制。内毒素处理培养的人脐静脉内皮细胞造成细胞凋亡。培养液中添加系列浓度的丹参水溶性成分培养细胞,倒置相差显微镜观测细胞形态变化。吖啶橙染色,共聚焦显微镜观测凋亡细胞核片段化状况;PI染核,流式细胞仪检测细胞周期分布。

科学性、先进性及独特之处

现有的丹参保护血管内皮细胞的研究,均针对丹参复方、丹参全成分或丹参的脂溶性成分;未见关于丹参水溶性部位对血管内皮药理作用的报道。而鉴于中药传统的用药方式,研究丹参水溶性部位的药理活性更有意义。我们利用内毒素(脂多糖,LPS)诱导人脐静脉血管内皮细胞(Human Umbilical Vascular Endothelial Cells, HUVEC)凋亡,研究丹参水溶性部位对血管内皮细胞的保护作用。

应用价值和现实意义

实验结果表明,内毒素处理使血管内皮细胞形成大量凋亡小体,细胞核片段化严重。同时显著降低了细胞存活率,改变了细胞周期的正常分布,阻止细胞由G1期进入S期。而丹参水溶性部位在一定浓度范围内,剂量依赖性地显著抑制了内毒素诱导的细胞凋亡小体的形成;提高了细胞存活率,使细胞周期基本恢复正常。该结果表明丹参水溶性部位能够抑制内毒素诱导的血管内皮细胞凋亡。

学术论文摘要

[1]杜冠华,张均田.丹参现代研究概况与进展[J].医药导报,2004,23(6): 355-360. [2]吴立玲主编.心血管病理生理学[M].北京:北京医科大学出版社,2000,8-10. [3]Landmesser U, Drexl ER H.The clinical significance of endothelial dysfunction[J].Curr Opin Cardiol,2005,20:547-551. [4]王志华,黄姝芬.复方丹参滴丸对冠心病患者血管内皮功能影响[J].海南医学,2007,18(4):17-19. [7]Jaffe, E.A., Nachman, R.L., Becker, C.G.. Culture of human endothelial cells derived from umbilical veins[J].J Clin. Invest ,1973,52:2745-2756.

获奖情况

鉴定结果

参考文献

[1]杜冠华,张均田.丹参现代研究概况与进展[J].医药导报,2004,23(6): 355-360. [2]吴立玲主编.心血管病理生理学[M].北京:北京医科大学出版社,2000,8-10. [3]Landmesser U, Drexl ER H.The clinical significance of endothelial dysfunction[J].Curr Opin Cardiol,2005,20:547-551. [4]王志华,黄姝芬.复方丹参滴丸对冠心病患者血管内皮功能影响[J].海南医学,2007,18(4):17-19. [5]魏林树.丹参对脑缺血再灌注区白细胞与内皮细胞粘附的影响[J].西南国防医药,2006,16(6):596-597. [6]李林平,孙晓斐,武宗寅,等.丹参酮ⅡA磺酸钠对不稳定型心绞痛患者血管内皮功能的影响[J].济宁医学院学报,2008,31(3):288-290. [7]Jaffe, E.A., Nachman, R.L., Becker, C.G.. Culture of human endothelial cells derived from umbilical veins[J].J Clin. Invest ,1973,52:2745-2756. [8]Qitao Zhao, Nan Wang, Ru Jia, Shangli Zhang, Junying Miao. Integrin β4 is a target of rattlesnake venom during inducing apoptosis of vascular endothelial cells[J].Vascular Pharmacology,2004,41:1-6. [9]许冬青,张 旭,蔡文峰,等.丹参药物血清保护血管内皮细胞分子机制研究[J].中成药,2005,27(2):229-230. [10]方丽娟,刘乃丰.细胞凋亡与动脉粥样硬化关系的研究进展[J].东南大学学报(医学版),2010,1:107-110. [11]王桂霞,刘 义,杨春玲.原花青素对血管内皮细胞过氧化氢损伤的保护作用[J].中国动脉硬化杂志,2009,17(3):193-196.

同类课题研究水平概述

现有的丹参保护血管内皮细胞的研究,均针对丹参复方、丹参全成分或丹参的脂溶性成分;未见关于丹参水溶性部位对血管内皮药理作用的报道。而鉴于中药传统的用药方式,研究丹参水溶性部位的药理活性更有意义。我们利用内毒素(脂多糖,LPS)诱导人脐静脉血管内皮细胞(Human Umbilical Vascular Endothelial Cells, HUVEC)凋亡,研究丹参水溶性部位对血管内皮细胞的保护作用。 参考文献 [1]杜冠华,张均田.丹参现代研究概况与进展[J].医药导报,2004,23(6): 355-360. [2]吴立玲主编.心血管病理生理学[M].北京:北京医科大学出版社,2000,8-10. [3]Landmesser U, Drexl ER H.The clinical significance of endothelial dysfunction[J].Curr Opin Cardiol,2005,20:547-551. [4]王志华,黄姝芬.复方丹参滴丸对冠心病患者血管内皮功能影响[J].海南医学,2007,18(4):17-19. [5]魏林树.丹参对脑缺血再灌注区白细胞与内皮细胞粘附的影响[J].西南国防医药,2006,16(6):596-597. [6]李林平,孙晓斐,武宗寅,等.丹参酮ⅡA磺酸钠对不稳定型心绞痛患者血管内皮功能的影响[J].济宁医学院学报,2008,31(3):288-290. [7]Jaffe, E.A., Nachman, R.L., Becker, C.G.. Culture of human endothelial cells derived from umbilical veins[J].J Clin. Invest ,1973,52:2745-2756. [8]Qitao Zhao, Nan Wang, Ru Jia, Shangli Zhang, Junying Miao. Integrin β4 is a target of rattlesnake venom during inducing apoptosis of vascular endothelial cells[J].Vascular Pharmacology,2004,41:1-6.
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