基本信息

项目名称:
氯化铵保护氢醌所致人胚肾HEK293细胞毒性及机制研究
小类:
生命科学
简介:
研究工业化学品氢醌所致人胚肾293细胞的细胞毒性及可能的损伤机制. 本实验设计研究不同浓度的氢醌在不同时间点对293细胞的细胞毒性.采用噻唑蓝法检测氢醌的细胞毒性作用;采用荧光分光光度计法测定经丫啶橙染色的溶酶体荧光强度的变化; 采用荧光分光光度计法测定线粒体膜电位的变化.为探讨可能的损伤机制,采用膜结构保护物质氯化铵干预后,检测氢醌所致293细胞的细胞毒性、溶酶体膜通透性及线粒体膜电位的改变。
详细介绍:
本课题主要是研究氯化铵保护氢醌(HQ)所致人胚肾HEK293细胞(293细胞)毒性及可能机制。 采用的试验方法如下: 1) 噻唑蓝(MTT)比色法检测氯化铵对不同浓度氢醌所致293细胞毒性保护作用; 2) 台盘兰染色检测氢醌染毒1h所致293细胞死亡率; 3) 荧光分光光度法测定293细胞经氢醌染毒1h后溶酶体完整性的变化以及线粒体膜电位的改变。 试验得出以下结果: 1) 24h和48h的MTT结果显示,NH4Cl对低浓度HQ所致293 细胞毒性具有保护作用; 2) HQ染毒1h所致293细胞死亡率小于13%; 3) HQ可以造成293细胞溶酶体和线粒体的损伤, NH4Cl对HQ 所致293细胞溶酶体损伤有一定的保护作用。 根据以上结果,我们得出结论: 1) NH4Cl对HQ所致293细胞毒性具有保护作用; 2) HQ所致293细胞毒性可能与其溶酶体和线粒体的损伤有关。

作品专业信息

撰写目的和基本思路

本文主要研究氯化铵保护氢醌(HQ)所致人胚肾HEK293细胞的毒性及可能机制。首先确定氯化铵对氢醌所致293细胞毒性具有保护作用,然后探讨这种保护作用是否与溶酶体、线粒体损伤有关。

科学性、先进性及独特之处

本文采用噻唑蓝(MTT)比色法、台盘兰染色法及荧光分光光度法对氯化铵保护氢醌(HQ)所致人胚肾HEK293细胞的毒性及可能机制进行研究。该研究在国内尚未见报道。

应用价值和现实意义

本研究发现:经NH4Cl预处理,能使较低剂量HQ所致293细胞的毒性显著降低,说明NH4Cl可以保护HQ所引起的毒性,并且日常生活中人们实际接触HQ的剂量也较低。因此氯化铵对低剂量HQ的保护作用有实际意义。

学术论文摘要

目的 研究氯化铵保护氢醌(HQ)所致人胚肾HEK293细胞(293细胞)毒性及可能机制。方法:噻唑蓝(MTT)比色法检测氯化铵对不同浓度氢醌所致293细胞毒性保护作用;台盘兰染色检测氢醌染毒1h所致293细胞死亡率;荧光分光光度法测定293细胞经氢醌染毒1h后溶酶体完整性的变化以及线粒体膜电位的改变。结果:24h和48h的MTT结果显示,NH4Cl对低浓度HQ所致293细胞毒性具有保护作用;HQ染毒1h所致293细胞死亡率小于13%; HQ可以造成293细胞溶酶体和线粒体的损伤, NH4Cl对HQ所致293细胞溶酶体损伤有一定的保护作用。结论:NH4Cl对HQ所致293细胞毒性具有保护作用,HQ所致293细胞毒性可能与其溶酶体和线粒体的损伤有关。

获奖情况

鉴定结果

参考文献

荧光分光光度法检测线粒体膜电位及溶酶体膜完整性 方法参考文献: Pourahmad, J., O’Brien, P.J., Jokar, F., Daraei, B.. Carcinogenic metal induced sitesof reactive oxygen species formation in hepatocytes. Toxicol. In Vitro ,2003,17, 803–810. 讨论参考文献: 1. de Duve, C., de Barsy, T., Poole, B., Trouet, A., Tulkens, P., and van Hoof, F.. Lysomotropic agents. Biochem. Pharmacol. 1974,23, 2495–2531. 2. Ohkuma, S., and Poole, B.. Fluorescence probe measurement of the intralysosomal pHin living cells and the perturbation of pHby various agents. Proc. Natl. Acad. Sci. 1978,USA 75, 3327–3331.

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